Определение полиморфного сайта с помощью метода ПДРФ
Один из самых распространенных методов детекции SNP (однонуклеотидных замен) — это определение полиморфного сайта с помощью метода ПДРФ, который заключается в ПЦР-амплификации интересующего фрагмента и его расщеплении соответствующей эндонуклеазой рестрикции. Дальнейшее разделение продуктов рестрикции с помощью электрофореза в агарозном или полиакриламидном геле позволяет по картине полиморфизма длин рестрикционных фрагментов выявлять искомое изменение. Благодаря простоте и надёжности, относительно низкой себестоимости, метод получил широкое распространение и до сих пор популярен, хотя и имеет некоторые ограничения — он позволяет детектировать только замены, расположенные в сайтах рестрикции.
Области применения:
- генетика предрасположенностей;
- моногенные заболевания;
- определение причин бесплодия и невынашивания беременности;
- геномная дактилоскопия и др.
Электрофоретические камеры для фрагментного анализа